ファインダーの構造が異なります。
二眼レフはミラーが固定されており、撮影レンズとビューレンズの二つが付いています。
一眼レフは撮影用のレンズをそのままビューレンズとしても使うため、撮影時にはミラーがアップしてフィルム面に光が届く様になります。
二眼レフでは撮影している瞬間を見続けることが可能ですが、一眼レフでは撮影の瞬間はファインダーに光が来ないので、撮影している瞬間を見ることができません。いわゆるブラックアウトです。
また二眼レフは撮影レンズとビューレンズの位置が異なるために、実際に写る範囲と若干ずれた画像を見ることになりますが、一眼レフでは全く同じ状況を見る頃が可能です。